اقرأ في هذا المقال
يقوم موظفين مختبر الأحياء الدقيقة السريري، على تحضير العديد من أنواع الميديا المختلفة حيث يوجد قسم مختص في تحضير العديد من أنواع الميديا الصناعية داخل مختبر الأحياء الدقيقة السريري، حيث يعتمد موظفي هذا القسم في تحضير أنواع الميديا المختلفة على حسب حاجة الكائنات الحية الدقيقة لمعايير النمو والتكاثر لتكوين مستعمرات من الخلايا الميكروبية التي يسهل عزلها ودراستها وأيضاً في الاعتماد على حاجة أقسام الأحياء الدقيقة السريرية المختلفة من أجل تشخيص العينات المرضية ومعرفة مسبب المرض.
ما هي ميديا MHA؟
ميديا (MHA): هي اختصار (Mueller Hinton Agar)، حيث تم اكتشاف هذا النوع من الميديا من قبل العالم في علم الأحياء الدقيقة مولر وهينتون عام 1941، وتم اكتشافها من أجل عزل أنواع معينة من المستعمرات البكتيرية مثل بكتيريا (Neisseria species)، وأيضاً من أجل استخدامها في اختبار الحساسية للمضادات الحيوية داخل مختبر الأحياء الدقيقة السريري للعديد من أنواع العينات البكتيرية.
المكونات الأساسية في ميديا MHA:
أثناء تحضير الميديا تختلف المواد الأساسية المكونة للميديا من نوع إلى آخر، وقد تختلف أنواع الميديا في العناصر الغذائية الموجودة في الميديا أو قد تختلف في مصادر الطاقة التي تكون في أغلب الأحيان عبارة عن أنواع من السكر أو نوع من أنواع الكربوهيدرات مثل النشأ، أو قد تختلف في مؤشر الرقم الهيدروجيني (PH) أو ما يعرف في درجة الحموضة، إما بالنسبة لميديا (MHA) تتكون من عناصر غذائية ومعايير للنمو ومن أهمها:
- الماء المقطر (Distilled Water).
- مصدر طاقة عبارة عن نشأ، حيث يقوم مصدر الطاقة على أمداد خلايا البكتيرية بالطاقة من أجل النمو والتكاثر لتكوين مستعمرات بكتيرية.
- آجار (Agar) صناعي ويكون على شكل باودر.
- جزء من الأنسجة الحيوانية المخصبة، وتعتبر مصدر غذائي.
- مؤشر للرقم الهيدروجيني (PH) ويفضل أن يكون الرقم الهيدروجيني داخل الميديا 7,3.
طريقة تحضير ميديا MHA:
- يجب ارتداء الكمامات والقفازات، وتعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات الكيميائية.
- تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في عملية تحضير الميديا.
- ضع الماء المقطر في القارورة الزجاجية المعقمة (FLASK)، وضع القارورة على مصدر النار.
- ضع داخل القارورة الزجاجية المحرك المغناطيسي (magnatic)، ثم ضع ببطء وبشكل تدريجي الآجار الصناعي قبل إن يبدأ الماء بتسخين، ثم يتم رفع درجة الحرارة تدريجياً.
- مراقبة السائل إلى درجة الغليان، وبعد ذلك يتم تخفيض من درجة النار تدريجياً حتى يصيح السائل نقي ويذوب كامل الآجار.
- يتم وضع السائل داخل جهاز الأوتوكلاف (Autoclave) على درجة حرارة 121 درجة مئوية لمدة تتراوح ما بين 15 إلى 20 دقيقة.
- يتم بعد ذلك صب المزيج في أطباق (petri dishes) معقمة، وتركها حتى تبرد بدرجة حرارة الغرفة.
- يتم تدوين تاريخ ووقت التحضير على (petri dishes)، وتخزينها في ثلاجة معقمة ضمن درجة حرارة تتراوح ما بين 2 إلى 8 درجة مئوية.
- تعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات الكيميائية، بالإضافة إلى تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في عملية تحضير الميديا.
ضبط الجودة في تحضير ميديا MHA:
- يجب الالتزام في ارتداء الكمامات والقفازات أثناء تحضير الميديا.
- يجب الالتزام في أساليب وطرق التعقيم المتبعة في قسم الأحياء الدقيقة السريري لمنع تلوث الميديا أثناء تحضيرها.
- يجب مراقبة المستمرة لدرجة حرارة ثلاجة التخزين، وأيضاً درجة حرارة الأوتوكلاف (Autoclave).
- اتباع قوانين السلامة العامة أثناء تحضير الميديا.
- مراقبة مؤشر الرقم الهيدروجيني للميديا.
- وضع عبوة الآجار المصنوع في مكان تخزين بعيداً عن أي مصدر تلوث.
- اتباع خطوات التحضير للميديا، المدونة على عبوة الآجار (ager).
لماذا تستخدم ميديا MHA في اختبار الحساسية للمضادات الحيوية؟
تستخدم الميديا من نوع (MHA) في أغلب اختبارات الحساسية للمضادات الحيوية، وذلك لأن الميديا (MHA) تعتبر غير انتقائية وغير تفاضلية (non-selective and non-differential) أي أنها جميع أنواع الكائنات الحية تقريباً تستطيع النمو وتكاثر من خلالها، وأيضاً أن من مكونات الأساسية للميديا هي النشأ حيث يقوم النشأ على امتصاص السموم المنبعثة من الخلايا البكتيرية بالتالي لا يوجد أي سموم بكتيرية يمكن أن تتداخل في مبدأ عمل المضادات الحيوية، حيث أن مكونات (MHA) تسمح باستخدام نطاق واسع من أنواع المضادات الحيوية التي يمكن استخدامها في قسم الأحياء الدقيقة السريري.
محدوديات ميديا MHA:
قد ينتج تعطيل مبدأ عمل المضادات الحيوية المستخدمة في اختبار الحساسية للمضادات الحيوية، عندما تكون فترة الحضانة طويلة داخل الحاضنة، لذا ينصح في مراقبة المستمرة للمضادات الحيوية وسرعة تستجيل النتائج.
