المستنبتات النقية:
في البيئات الطبيعية تنمو الأحياء الدقيقة بشكل مُختلف، حيث أنها تُشكل مشكلة في دراستها لوجود الأنواع المُختلفة، والتي تعطي تفاعلات كيماوية مُختلفة؛ لذلك إذا أردت دراسة خصائص نوع واحد من الكائنات الحية الدقيقة، فلا بد من عزلها بشكل نقي فمن طرق العزل ما يلي:
- طريقة النشر بواسطة قضيب زجاجي (Spread plate).
- طريقة النشر بواسطة التخطيط (Streak plate).
- طريقة الصب بالتخفيف (Pour Plate).
1- طريقة النشر بواسطة قضيب زجاجي (Spread plate):
حيث يتم نشر المادة المراد عزل الأحياء الدقيقة منها على سطح وسط غذائي صلب، بأن يعقم قضيب زجاجي خاص لهذا الغرض ومن ثم ينغمس في المحلول وينشر فوق السطح الصلب للوسط الغذائي، ويتوقع أن يكون عدد الأحياء الدقيقة المراد عزلها بشكل نقي في العينات قليل جداً، حيث تُؤدي كل خلية بعد نشرها وحضانتها إلى تكوين مستعمرة من نفس النوع، الأمر الذي يُؤدي إلى فصلها عن بقية المستعمرات.
2- طريقة النشر بواسطة التخطيط (Streak plate):
بعد تعقيم المكان المراد العمل فوقه بالكحول أو غيره وإشعال لهب بنسن لتعقيم الحلقة المعدنية (Wire Loop)، ثم تُؤخذ عينة من المادة المراد عزل الأحياء الدقيقة منها، حيث يتم تخطيطها على وسط غذائي صلب، بعد زراعة العينة على الوسط الغذائي المناسب، يتم وضع جميع الأطباق في الحضانة على درجة حرارة مناسبة على سبيل المثال 37 درجة مئوية وهي درجة الحرارة المناسبة لنمو العديد من البكتيريا.
3- طريقة الصب بالتخفيف (Pour Plate):
تطبق هذه الطريقة كثيراً على البكتيريا والفطريات خاصة إذا كانت هذه الأحياء الدقيقة عالية التركيز، لذلك تؤخذ كمية محدودة على سبيل المثال (1-3 سم)، ويجري تخفيفها عدة مرات بواسطة إضافتها إلى كميات محدودة من المياة المقطرة والمعقمة في أنابيب مخبرية معقمة، وبعد التخفيف يؤخذ (1-3 سم) من كل تخفيف ويوضع في طبق بتري معقم، ثم يضاف إليه الوسط الغذائي الخاص والذائب، حيث تكون درجة حرارته عند إضافته إلى أطباق البتري حوالي 45 درجة مئوية، ثم تخلط جيداً وتترك حتى يجمد الوسط الغذائي ومعه عينة الأحياء الدقيقة، ثم تتم حضانتها على درجة الحرارة المناسبة ولفترة مُعينة (37 درجة مئوية ولمدة 24 ساعة).
وبعد الحضانة تكون مستعمرات الأحياء الدقيقة وبالأخص البكتيريا بعيدة عن بعضها، ممّا يسهل عملية إعادة زراعتها على أطباق أخرى من الأوساط الغذائية؛ بحيث تكون نقية وجاهزة لإجراء العديد من التجارب عليها تمهيداً لتعريفها.
