اقرأ في هذا المقال
- ما هي تقنية الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC)؟
- ما هو مبدأ عمل الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء – HPLC؟
- ما هي معدات – HPLC -؟
- أنواع أخرى من HPLC
ما هي تقنية الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC)؟
الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء هو شكل من أشكال اللوني السائل لفصل المركبات التي تذوب في المحلول، وهي أداة قوية في التحليل. تتكون أجهزة (HPLC) من خزان طور متحرك ومضخة وحاقن وعمود فصل وكاشف. يتم فصل المركبات عن طريق حقن سدادة من خليط العينة في العمود. تمر المكونات المختلفة في الخليط عبر العمود بمعدلات مختلفة بسبب الاختلافات في سلوك التقسيم بين الطور السائل المتحرك والمرحلة الثابتة.
ما هو مبدأ عمل الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء – HPLC؟
الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC) هي شكل من أشكال كروماتوغرافيا العمود التي تضخ خليط عينة أو مادة تحليلية في مذيب (يُعرف بالطور المتحرك) عند ضغط عالٍ من خلال عمود به مادة تعبئة كروماتوغرافية (مرحلة ثابتة). تُحمل العينة بواسطة تيار غاز ناقل متحرك من الهيليوم أو النيتروجين. (HPLC) لديه القدرة على فصل وتحديد المركبات الموجودة في أي عينة، والتي يمكن إذابتها في سائل بتركيزات ضئيلة تصل إلى أجزاء لكل تريليون. بسبب هذا التنوع، يتم استخدام (HPLC) في مجموعة متنوعة من التطبيقات الصناعية والعلمية، مثل الأدوية والبيئية والطب الشرعي والمواد الكيميائية.
ما هي معدات – HPLC -؟
تشمل المكونات الرئيسية في نظام HPLC خزان المذيبات، أو الخزانات المتعددة ومضخة الضغط العالي والعمود ونظام الحاقن والكاشف. يحتفظ الخزان بالمذيب، والذي يشار إليه بالطور المتحرك لأنّه يتحرك. عادةً ما يكون هناك ما لا يقل عن خزانين في النظام، يحتوي كل منهما على ما يصل إلى 1000 سم مكعب من المذيب وعادةً ما يكون مزودًا بناشر غاز يمكن من خلاله فقاعات الهيليوم. تستخدم المضخة لتوليد تدفق محدد لمرحلة الحركة.
أنواع أخرى من HPLC:
جهاز كروماتوغرافيا سائل فائق الأداء (uHPLC): حيث يستخدم (HPLC) القياسي عادةً جزيئات العمود بأحجام من 3 إلى 5 ميكرومتر وضغوط تبلغ حوالي 400 بار، يستخدم (uHPLC) أعمدة مصممة خصيصًا بجزيئات يصل حجمها إلى 1.7 ميكرومتر، عند ضغوط تزيد عن 1000 بار. الميزة الرئيسية لـ (uHPLC) هي السرعة. هذه الأنظمة أسرع وأكثر حساسية وتعتمد على أحجام أصغر من المذيبات العضوية من (HPLC) القياسي، ممّا ينتج عنه القدرة على تشغيل المزيد من العينات في وقت أقل.
ومع ذلك، إذا تمّ تشغيل الأنظمة عند ضغوط نموذجية تزيد عن 800 بار، فإنّ الأعمدة تتقادم أو تتحلل بشكل أسرع. يتم تطوير تقنية أحدث لوحدات (uHPLC) لاستخدام جزيئات العمود بحجم 1 ميكرومتر، وإمكانات ضغط تصل إلى 6800 بار. تُعرف (uHPLC) أيضًا باسم (UPLCTM)، وهي علامة تجارية لشركة (Waters Corporation).
