تحضير الوسط الزراعي Chocolate agar

الوسط الزراعي (CHOC أو CAP) هو وسط غني (Enriched) غير انتقائي يستخدم لعزل وتحديد مسببات الأمراض الصعبة، حيث أن هذا الاسم مشتق من حقيقة تحلل كرات الدم الحمراء ويعطي الوسيط لوناً بنياً شوكولا.

مكونات الوسط الزراعي Chocolate agar

تكوين الوسط الزراعي (Chocolate agar) هو نفس تكوين الوسط الزراعي (Blood agar)، الفرق الوحيد هو تسخين أجار الدم (Blood agar) في حمام مائي لتحضير أجار الشوكولا (Chocolate agar)، ومع ذلك فإن وسط أجار الشوكولاتة المتاح تجارياً له تركيبة مختلفة ولا يتطلب إضافة دم.

• 15.0 غ الكازين (Casien).

• نشا الذرة (Cornstarch).

• 4.0 غ فوسفات البوتاسيوم، ثنائي القاعدة ( Dipotassium phosphate).

• 1.0 غ فوسفات البوتاسيوم، أحادي القاعدة (Monopotassium phosphate).

• 5.0 غ كلوريد الصوديم (NaCl).

• 10 غ أجار.

• 500 مل محلول الهيموجلوبين 2%.

تحضير الوسط الزراعي Chocolate agar

تحضير محلول الهيموجلوبين

• إضافة الهيموجلوبين الماء المقطر حتى يصل الحجم إلى 500 مل.

• خلط الهيموجلوبين مع الماء المقطر جيدا لكن برفق.

• تعقيم بالبخار (Autoclave) لمدة 15 دقيقة عند 21 درجة المح مئوية.

• تبريد المحلول إلى درجة حرارة تصل إلى (45-50) درجة مئوية.

تحضير الوسط الزراعي

• إضافة المكونات باستثناء محلول الهيموجلوبين إلى الماء المقطر حتى يصل الجحم إلى 500 مل.

• خلط المكونات جميعها جيدا لكن برفق.

• تسخين المكونات جميعًا بالتدريج حتى درجة الغليان.

• تعقيم بالبخار (Autoclave) لمدة 15 دقيقة عند 21 درجة مئوية.

• تبريد المحلول إلى درجة حرارة تصل لغاية (45-50) درجة مئوية.

• إضافة 500 مل من محلول الهيموجلوبين المعقم المحضر مسبقاً ونخلطه جيداً.

• تفريغ أو صب المحلول في الأطباق المخصصة المعقمة (petri plate) أو توزع في أنابيب معقمة.

مبدأ الوسط الزراعي Chocolate agar

• أجار Chocolate agar مع إضافة المكملات الغذائية يعطي نمواً ممتازاً للكائنات الحية سريعة التحمل دون فرط نمو عن طريق تلويث الكائنات الحية.

• الكازين (Casien) والأنسجة الهضمية تزود الكائن الحي بالمغذيات النيتروجينبة والأحماض الأمينية والعناصر الأخرى لنمو الكائنات الحية.

• يعتبر أجار (Chocolate agar) نوعا مختلفا من أجار الدم (Blood agar) حيث يحتوي على خلايا الدم الحمراء التي يتم فصلها عن طريق التسخين البطيء إلى 80 درجة مئوية.

استخدامات الوسط الزراعي Chocolate agar

• يتم استخدامه في عزل الكائنات الحية الدقيقة الحساسة خاصة النيسيرية (Neissria) والأنواع المستدمية (Hemophilus).

• يتم استخدامه لعزل النيسيرية البنية المزمنة والحادة (Neissria gonorrhoeae) من التهابات المكورات البنية (Gonocococal Infection).