تحضير الوسط الزراعي MacConkey Agar

الوسط الزراعي (MacConkey Agar) هو أجار صلب وانتقائي وتفاضلي يزرع فقط في الأنواع البكتيريا سالبة الجرام ويثبط البكتيريا موجبة الجرام، ويمكنه التميز بين الكائنات الحية سالبة الجرام بناءاً على استقلاب اللاكتوز (Lactose metabolism).

مكونات الوسط الزراعي MacConkey Agar

• 10 غ ببتون (هضم البنكرياس للجلاتين).

• 3 غ ببتون البروتين (اللحوم والكازين).

• 10 غ مونوهيدرات اللاكتوز.

• 1.5 غ من الأملاح الصفراوية.

• 0.001 غ صبغة الكريستال البنفسجية (Crystal violat).

• 13.5 غ أجار.

• ماء مقطر

• 0.03 غ من اللون الأحمر المحايد.

مبدأ عمل الوسط الزراعي MacConkey Agar

• يوفر هضم البنكرياس للجلاتين والببتون (اللحوم والكازين) العناصر الغذائية الأساسية والفيتامينات والعوامل النيتروجينية اللازمة لنمو الكائنات الحية الدقيقة.

• مونوهيدرات اللاكتوز هو المصدر المخمر للكربوهيدرات والتي تعتبر مثبطة لمعظم الأنواع البكتيرية موجبة الجرام.

• يحافظ كلوريد الصوديوم على التوازن الأسموزي في الوسط.

تنمو سلالات التخمر اللاكتوز باللون الأحمر أو الوردي، حيث يرجع اللون الأحمر إلى إنتاج الحمض من اللاكتوز وامتصاص اللون الأحمر المحايد، كما يتغير لون الصبغة عندما ينخفض الرقم الهيدروجيني للوسط 6.8 عندها لا تستطيع البكتيريا التي لا تحتوي على اللاكتوز متل السالمونيلا (Salmonella)، البروتيوس (Proteus) والشيقيلا (Shigella) الاستفادة من اللاكتوز وستستخدم الببتون بدلاً منه، ويشكل هذا الأمونيا مما يرفع درجة الحموضة في الوسط الزراعي ويؤدي إلى تكوين مستعمرات بيضاء أو عديمة اللون ويضل الوسط المحيط بالبكتيريا شفافًا نسبياً ويمكن أن تبدو هذه المستعمرات أيضًا إلى ذهبية اللون مع وجود مراكز داكنة.

كيفية تحضير الوسط الزراعي MacConkey Agar

• ارتداء القفازات والأدوات السلامة العامة وتعقيم مساحة العمل.

• تعقيم كافة الأدوات التي نريد استخدامها في تحضير الوسط الزراعي.

• نأخذ 49.53 جرام من الوسط المجفف في 1000 مل من الماء المقطر.

• تسخين المحلول حتى درجة الغليان لإذابة الوسط تماماً.

• تعقيم بالبخار المضغوط (Autoclave) عند درجة حرارة 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

• تبريد الوسط إلى (45-50) درجة مئوية.

• خلط المحلول جيداً لكن برفق وصبة في الأطباق المعقمة (Petri plates).

استخدامات الوسط الزراعي MacConkey Agar

• يستخدم الوسط الزراعي (MacConkey Agar) لعزل البكتيريا المعوية السالبة الجرام التي تستطيع أن تخمر اللاكتوز والتي لا تستطيع أن تخمره.

• يستخدم في الفحص الميكروبيولوجي للمواد الغذائية وتلقيح عينات المياه.

ملاحظة: عند احتضان (MacConkey Agar) في الحاضانات بتراكيز كبيرة من ثاني أكسيد الكربون (CO2) عندها يثبط نمو المستعمرات البكتيرية سالبة الجرام.