ميديا MacConkey Agar المستخدمة في مختبر الميكروبيولوجي

يحتوي مختبر الأحياء الدقيقة السريري على العديد من أنواع الميديا المختلفة، حيث إن لكل نوع من أنواع هذه الميديا خصائص يختلف فيها عن الآخر إما من ناحية طرق التحضير، وأيضاً من ناحية توفر العناصر الغذائية ومعايير النمو المختلفة حيث يسعى مختبر الأحياء الدقيقة السريري إلى توفر وسائط غذائية صناعية تدعم نمو وتكاثر وعزل ودراسة أنواع مختلفة من الكائنات الحية الدقيقة.

ما هي ميديا MacConkey Agar؟

ميديا (MacConkey Agar): هي إحدى أنواع الميديا الذي يتم تحضيرها صناعياً في المختبر، حيث إنها عبارة عن وسط زراعة بكتيري سمي على اسم عالم البكتيريا ألفريد تي ماكونكي الذي اكتشف هذا النوع من الميديا عام (1931).

وتعتبر ميديا (MacCOnKey ager) من أكثر أنواع الميديا استخداماً في مختبر الأحياء الدقيقة كما إنه وسط انتقائي وتفاضلي (selective and differential)، وسبب في غنه انتقائي (selective) لأنه يعزز نمو البكتيريا سالبة الجرام ويثبط نمو البكتيريا موجبة الجرام وذلك بسبب وجود أملاح (Bile salts) وصبغة (crystal violet) حيث لهم دور في منع نمو البكتيريا موجبة الجرام.

إما بالنسبة في أن هذه الميديا تفاضلية (differential) تقوم على تميز بين البكتيريا سالبة الجرام، وذلك لأنه يحتوي في مكوناته على صبغة حساسة لدرجة الحموضة تسمى (neutral red) وأيضاً يحتوي على اللاكتوز نوع من أنواع السكر.

حيث إن البكتيريا التي تستخدم اللاكتوز مصدر غذائي تؤدي إلى تخمره (lactose-fermenters) وإنتاج مخلفات عضوية وأحماض وهذه المخلفات تؤدي إلى تغير لون الصبغة الحساسة لدرجة الحموضة من اللون الأحمر إلى اللون الوردي ونمو مستعمرات بكتيرية زهرية زاهية إما بالنسبة للبكتيريا التي لا تستخدم اللاكتوز كمصدر للغذاء لا تستطيع تخمر اللاكتوز (non-lactose fermenters) بالتالي تنمو مستعمراتها من خلايا بكتيرية عديمة ألون.

مكونات ميديا MacCOnKey ager:

يسعى مختبر الأحياء الدقيقة السريري على تحضير الميديا ضمن مكونات أساسية تجعل الميديا بتعزيز نمو الخلايا البكتيرية المراد عزلها ودراستها ومعرفة نوع المضادات الحيوية المقاومة لهذا الخلايا البكتيرية، ومن أهم المكونات التي يتم اختيارها أثناء تحضير ميديا (MacCOnKey ager):

• البيبتون (Peptone).

• جزء من الأنسجة الحيوانية المهضومة.

• اللاكتوز (Lactose monohydrate).

• أملاح صفراء (Bile salts).

• كلوريد الصوديوم (NA CL).

• صبغة حساسة لدرجة الحموضة (Neutral red).

• صبغة (Crystal Violet).

• أجار (Agar) مصنع على شكل باودر.

• ماء مقطر (Distilled Water).

طريقة تحضير ميديا MacCOnKey ager:

• ارتداء القفازات والكمامات، وتعقيم مساحة العمل باستخدام المطهرات الكيميائية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات قبل استخدامه في عملية تحضير الميديا.

• ضع الماء المقطر في القارورة الزجاجية معقمة (Flask)، بحيث تكون الكمية الماء مناسب مع كمية المراد تحضيرها.

• ضع القارورة الزجاجية على مصدر النار، ثم ضع المحرك المغناطيسي داخل القارورة.

• ضع كمية الأجار (Agar) ببطء وبشكل تدريجي في القارورة الزجاجية قبل إن يسخن الماء، ثم أرفع درجة حرارة النار تدريجياً.

• مراقبة المستمرة للسائل حتى يصل إلى درجة الغليان، ثم خفض درجة الحرارة تدريجياً حتى يتحول السائل إلى الشكل النقي.

• وضع السائل في حمام مائي تصل درجة حرارته إلى 50 درجة مئوية.

• صب السائل في (Petri plates) معقمة بعد إن يبرد.

• تسجيل تاريخ ووقت التحضير على (Petri plates)، ثم تخزينها في ثلاجات معقمة في درجة حرارة تتراوح ما بين 2 إلى 6 درجة مئوية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في الإضافة لتعقيم مساحة العمل.

مبدأ عمل ميديا MacCOnKey ager:

تستخدم ميديا (MacCOnKey ager) لتعزيز نمو البكتيريا السالبة الجرام وتثبيط نمو البكتيريا موجبة الجرام، كما يستخدم لتميز بين أنواع البكتيريا سالبة الحرام من حيث قدرتها على تخمر اللاكتوز أم لا، حيث إنه توفر الأنسجة الحيوانية المهضومة العناصر الغذائية الأساسية والفيتامينات والعوامل النيتروجينية اللازمة لنمو وتكاثر الكائنات الحية الدقيقة، كما يقوم  كلوريد الصوديوم على المحافظة التوازن الأسموزي في الوسط الميديا، كما تقوم الأملاح والصبغة (crystal violet) على تثبيط نمو البكتيريا موجبة الجرام.

استخدامات ميديا MacCOnKey ager:

• يستخدم أجار (MacConkey) لعزل البكتيريا المعوية (enteric bacteria) سالبة الجرام.

• يتم استخدامه في التمايز بين تخمير اللاكتوز (lactose fermenting) والبكتيريا سالبة الجرام غير مخمرة للاكتوز (non-fermenting).

• يستخدم لعزل البكتيريا المسببة للأمراض في الأمعاء (intestinal pathogens).

محدوديات ميديا MacConkey Agar:

• بعض السلالات من عائلات البكتيريا سالبة الجرام تفشل في النمو وتكاثر على هذا الوسط، لذا لا بد من زرعتها في وسط الميديا أخرى يعزز نمو بكتيريا سالبة الجرام.

• عند احتضان (MacConkey Agar) في الحاضنات بتراكيز كبيرة من ثاني أكسيد الكربون (CO2)، يثبط نمو المستعمرات الكبتيرية سالبة الجرام.