اقرأ في هذا المقال
يقوم قسم الأحياء الدقيقة السريرية في المختبر على تشخيص العديد من الحالات المرضية التي تسببها الكائنات الحية الدقيقة مثل البكتيريا والفطريات والفيروسات والطفيليات، ويستخدم قسم الميكروبيولوجي العديد من طرق والوسائط لمعرفة مسبب المرض والحالات التهابية، وأيضاً معرفة نوع المضادات الحيوية التي قد تكون حساسة لنوع الميكروب المسبب للمرض أو التهاب.
ما هي الميديا؟
تتطلب عملية معرفة أنواع الكائنات الحية الدقيقة طرق لعزلها عن أي شيء في المحيط الخارجي لتجنب تلوثها مع أي كائن حي أخر، وأيضاً توفير وسط غذائي ملائم لنمو هذه الكائنات وتكاثرها، لذلك تم تصميم وسائط تقوم على عزل الكائنات الحية عن أي مصادر خارجية وتوفير وسط غذائي لها داخل المختبر وهو ما يعرف في اسم الميديا، يتم تحضير الميديا داخل المختبر لنمو الكائنات الحية الدقيقة داخلة لسهولة الوصل إلى نوع الميكروب المسبب للمرض وتشخيص الحالة المرضية وتختلف أنواع الميديا من ناحية المكونات التحضيرية باختلاف نوع الميكروب المسبب للمرض سوأ كانت بكتيريا هوائية أو اللاهوائية أو فطريات أو غيرها من الميكروبات.
الهدف من الحصول على الميديا:
الميديا عبارة عن خليط متجانس من العناصر الغذائية التي تحتاجها الميكروبات للنمو، كما يوفر سطح الميديا الرطوبة ودرجة الحموضة اللازمة لنمو الميكروبات، ويتم تحضير الميديا داخل المختبر للحصول على عدة اهداف أهمها:
- توفير وسط يجمع العناصر الغذائية المختلفة الازمة لنمو الميكروبات وتكاثرها.
- الحصول على وسط لعزل وتحديد نوع الميكروب والكشف عن خصائصه الأيضية.
- الحصول على زراعة نقية غير ملوثة بأنواع أخرى من الميكروبات.
طرق تحضير الميديا داخل مختبر الميكروبيولوجي:
تعتبر طرق تحضير الميديا مختلفة باختلاف نوع الميديا، لكن هناك سلسلة ثابتة من الإجراءات والخطوات لتحضير أنواع مختلفة من الميديا وتتلخص هذه السلسلة كما يلي:
1- تعقيم الأدوات المستخدمة:
يجب قبل إجراء أي عملية تحضيرية للميديا أو أي إجراء طبي داخل قسم الميكروبيولوجي، تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في العمل وذلك لتجنب أي تلوث مصدره الكائنات الحية الدقيقة الموجودة في الهواء أو الجو، لأن إحدى أهداف تحضير الميديا الحصول على الميكروبات الممرضة بشكل نقي بعيداً عن أي نوع من ملوثات الأخرى.
ويوجد هناك عدة طرق لتعقيم المعدات داخل قسم الميكروبيولوجي منها باستخدام الأشعة الكهرومغناطيسية سواء كان الأشعة فوق بنفسجية أو الأشعة السينية أو أشعة جاما، أو استخدام الطرق الفيزيائية منها الغليان أو البسترة بالإضافة للطرق الكيميائية واستخدام المطهرات مثل الكحول أو الإيثانول أو عن طريق الضغط البخاري باستخدام جهاز الأوتوكلاف (autoclave) أو استخدام الحرارة الجافة.
2- البدء في عملية التحضير:
قبل البدء بعملية تحضير الميديا يجب تحضير وإحضار كافة الأدوات والمعدات إلى مساحة العمل بعد إجراء عمليات التعقيم لهم، ويجب ارتداء القفازات والكمامات والنظارات الواقية والمعطف (lab coats) لتجنب حدوث عمليات تلوث أثناء عملية التحضير وتتلخص عملية تحضير الميديا في ما يلي:
- يجب تحديد الكمية المراد تحضيرها من الميديا لمعرفة الكمية البودرة المستخدمة من الآجار (ager).
- قم بقياس الكمية المناسبة من بودرة الآجار (ager) وهي البودرة المستخدمة في صناعة الميديا، ويتم تحديد الوزن باستخدام الميزان الكتروني.
- املأ القارورة الزجاجية (flask) بكمية مناسبة من الماء ويتم تحديد كمية المياه حسب كمية البودرة الآجار المستخدمة ووضع (flask) على موقد النار من أجل التسخين، بعد ذلك يتم إسقاط المحرك المغناطسي (magnetic) داخل القارورة الزجاجية من أجل التحرك المستمر داخل القارورة.
- بعد ذلك يتم وضع كمية من البودرة الآجار التي تم توزينها ببطء داخل القارورة الزجاجية، ورفع درجة حرارة النار بشكل تدريجي.
- يجب الانتباه إلى عدم تسخين الماء قبل وضع مسحوق الآجار لأنه لا يذوب في الماء الساخن.
- يجب مراقبة القارورة الزجاجية بشكل مستمر حتى وصل إلى درجة الغليان، بعد ذلك يجب تقليل من درجة حرارة النار بشكل تدريجي، حيث انه مجرد الوصول السائل إلى درجة الغليان سوف نلاحظ إن السائل أصبح صافياً وليس غائم مما يدل على مسحوق الآجار قد ذاب بالكامل.
- يجب تعقيم الكامل لأنابيب الاختبار (plates) قبل صب سائل الآجار فيها.
- بعد تعقيم (plates) يتم صب السائل فيها، ويتم بعد ذلك تعقيم (plates) مرة أخرى لتجنب أي من حالات التلوث.
- يتم وضع الاصق على أطراف (plates) لتجنب التلوث لها، وتخزينها في ثلاجات معقمة ضمن درجة حرارة 4 درجة مئوية بعيداً عن أي مصدر تلوث.
