ميديا S.S Agar المستخدمة في مختبر الميكروبيولوجي

قد يحتاج مختبر الأحياء الدقيقة السريري في بعض الأحيان تحضير  أنواع خاصة من الميديا، بحيث تكون هذه الميديا خاصة في أنواع معينة من البكتيريا الممرضة، وذلك لسهولة التميز في ما بينها من خلال مراقبة شكل ولون المستعمرات البكتيرية التي تنمو وتتكاثر داخل هذه الميديا، وأيضاً سهولة عزلها ودراسة العمليات الأيضية الخاصة بها.

ما هي ميديا S.S Agar؟

ميديا (S.S Agar): هي إحدى أنواع الميديا الذي يتم تحضيرها صناعياً في المختبر، (S.S Agar) وهي اختصار لمصطلح (salmonalla shigella agar)، حيث إنه وسط بيئي صناعي ويعتبر من النوع الانتقائي التفاضلي (selective and differential)، حيث إنه هذا النوع من الميديا مخصص لنمو وتكاثر سلالات من بكتيريا (Salmonella spp) وبعض من سلالات بكتيريا (Shigella spp).

وتعتبر ميديا (S.S Agar) وسط انتقائي (selective medium) لأنه يقوم في تثبيط نمو البكتيريا موجبة الجرام بسبب إنه يتكون من أملاح مثل (bile salts) وبعض مكونات الأخرى تعمل على تثبيط موجبة الجرام، إما بالنسبة في إنه تفاضلي (differential medium) لأنه يعزز نمو سلالات بكتيريا (Salmonella spp) ويثبط نمو بعض من سلالات بكتيريا (Shigella spp)، كما إنه تم تطويرها صناعياً لتميز بين أنواع (Salmonella spp) الموجودة في الأطعمة من ناحية قدرة بعض السلالات على تخمر اللاكتوز وبعضها الآخر لا يستطيع تخمر اللاكتوز.

مكونات ميديا S.S Agar:

يتم تحضير ميديا (S.S Agar) بناءاً على إن هذه الميديا مخصصة لنمو سلالات بكتيريا (Salmonella spp) وبعض من سلالات بكتيريا (Shigella spp)، لذا يتم اختيار مكونات هذه الميديا لتعزز نمو هذه السلالات من البكتيريا وتثبيط السلالات الأخرى من البكتيريا، حيث إنه من خلال هذا مكونات تتوفر كافة معايير النمو وتكاثر من أجل نمو هذه السلالات وتكاثرها داخل الميديا لتكوين مستعمرات بكتيرية يسهل دراستها وعزلها، ومن أهم المكونات التي تتكون منها ميديا (S.S Agar):

• ماء مقطر (distilled water).

• اللاكتوز (Lactose).

• أملاح من نوع (Bile salts).

• سترات الصوديوم (Sodium citrate).

• ثيو سيلفات الصوديم (Sodium thiosulfate).

• بعض الأنسجة الحيوانية المهضومة.

• البيتون (Proteose peptone).

• سيترات الحديد (Ferric Citrate).

• صبغة (Brilliant green).

• صبغة (Neutral red).

• أجار (Agar) الموجود بشكل صناعي.

مبدأ عمل ميديا S.S Agar:

تتكون ميديا (S.S Agar) من أملاح وسيترات الصوديوم وصبغة (Brilliant Green) حيث إن لهم دور في تثبيط نمو البكتيريا موجبة الجرام مع السماح لعائلة (Salmonella spp) في النمو والتكاثر، كما توفر الأنسجة الحيوانية المهضومة وكازين مصادر للنيتروجين الكربون والفيتامينات اللازمة لنمو الكائن الحي، ويعتبر اللاكتوز هو الكربوهيدرات الموجودة في (Salmonella Shigella Agar).

إما بالنسبة الثيوسلفات (Thiosulfate) وسيترات الحديد (Ferric Citrate) لهم دور في الكشف عن كبريتيد الهيدروجين عن طريق إنتاج مستعمرات ذات مراكز سوداء، حيث إن دور (Neutral red) ذات اللون الأحمر المحايد يتحول إلى اللون الأحمر عندما يكون هناك تخمر اللاكتوز داخل الميديا يؤدي إلى إنتاج أحماض بالتالي يتغير المؤشر الرقم الهيدروجيني، مما يدل على حدوث التخمير.

طريقة تحضير ميديا Salmonella Shigella Agar:

• ارتداء القفازات والكمامات، وتعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات ومعقمات الكيميائية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

• ضع كمية من الماء المقطر في القارورة زجاجية معقمة (flask)، بحيث تكون كمية ماء المقطر تناسب كمية الميديا المراد تحضيرها.

• ضع القارورة الزجاجية على النار، ضع المحرك المغناطيسي في القارورة الزجاجية.

• ضع ببطء وبشكل تدريجي الأجار قبل إن يسخن الماء، رفع درجة حرارة النار تدريجياً.

• مراقبة القارورة الزجاجية حتى يذوب مسحوق الأجار بشكل كامل ويتحول المزيج إلى شكل النقي.

• يجب عدم وضع المزيج في الأوتوكلاف.

• يتم صب الميديا في (Petri plates) معقمة بعد أن تبرد وتصل درجة حرارتها من درجة حرارة الغرفة، استخدم ميزان الحرارة لمراقبة حرارة الميديا.

• ضع (Petri plates) في ثلاجة التخزين ضمن درجة حرارة 2 إلى 6 درجة مئوية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

استخدامات ميديا salmonalla shigella agar:

• يتم استخدامه كوسيط انتقائي وتفاضلي (selective and differential) لعزل السالمونيلا (Salmonella) وبعض أنواع الشيغيلا (Shigella) من العينات السريرية وغير السريرية.

• لا ينصح باستخدام هذه الميديا للعزل الأولي لبكتيريا (Shigella).

• تم تطوير هذه الميديا أيضًا للمساعدة في التفرقة بين تخمر اللاكتوز وعدم تخمره من العينات السريرية والأطعمة المشتبه بها وعينات أخرى التي قد تحتوي على سلالات من بكتيريا (salmonella).

نتائج ظهور المستعمرات البكتيرية على ميديا S.S Agar:

• تظهر مستعمرات بكتيريا (Shigella)، عديمة اللون، شفافة.

• تظهر مستعمرات بكتيريا (Salmonella)، عديمة اللون وشفافة ومركزها أسود إذا تم إنتاج كبريتيد الهيدروجين.