اقرأ في هذا المقال
- ما هو كلوريد الدانسيل
- الوظيفة العامة لكلوريد الدانسيل
- تفاعلات كاشف كلوريد الدانسيل مع الأحماض الأمينية
يتم استخدام كلوريد دانسيل ومشتقاته الأخرى لإنتاج مشتقات الدانسيل الفلورية للأحماض الأمينية والأمينات الأولية والثانوية والأحماض الدهنية والفينولات، ويتم استعراض إمكانات كلوريد الدانسيل ككاشف لوضع العلامات لاشتقاق الأمينات قبل تحديدها عن طريق تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء، و(Dansylation) وفصل وكشف الأمينات الأليفاتية منخفضة الكتلة الجزيئية والأمينات الحيوية بما في ذلك الأمينات المتعددة والأمينات العطرية من الأهمية السريرية.
ما هو كلوريد الدانسيل
مركب فلوري قوي يتفاعل مع المجموعة الأمينية الطرفية البروتين؛ وبعد التحلل المائي الحمضي لجميع روابط الببتيد الأخرى، يمكن التعرف على الحمض الأميني الطرفي على أنه مكمل بقايا، ويعتبر (Dansyl chloride)، المعروف أيضًا باسم 5- (dimethylamino) naphthalene-1-sulfonyl chloride) هو مركب يتفاعل مع المجموعة الأمينية الطرفية في الأمينات الأليفاتية والعطرية، وينتج عن التفاعل مركبات سلفوناميد زرقاء أو زرقاء وخضراء متألقة مستقرة.
الوظيفة العامة لكلوريد الدانسيل
يستخدم (Dansyl chloride) بشكل عام في تعديل الأحماض الأمينية كما هو الحال في تحليل تسلسل البروتين الأحماض الأمينية، وفي التحلل المائي الحمضي للروابط الببتيدية، يوصف الحمض الأميني الطرفي على أنه بقايا (danysylated)، ويستخدم كلوريد (Dansyl) أيضًا في وضع العلامات على المجموعات الوظيفية (ydroxyl وcarboxylic acid)، وهو أحد أبسط مشتقات السلفوناميد، وبالتالي يستخدم ككاشف أولي في إنتاج مشتقات أخرى.
تفاعلات كاشف كلوريد الدانسيل مع الأحماض الأمينية
يتفاعل الكاشف (dansyl chloride) مع المجموعات الأمينية الحرة من الببتيدات والبروتينات، ويكون التحلل الكلي الحمضي للببتيد أو البروتين المستبدل الذي ينتج عنه خليط من الأمينية الحرة الأحماض، بالإضافة إلى مشتق (dansyl) للحمض الأميني N-terminal)، الرابطة بين مجموعة (dansyl) والحمض الأميني (N-terminal) الذي يقاوم التحلل الحمضي.
يكون حمض (dansyl amino) متوهجًا تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية ويتم تحديده بواسطة كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة على ألواح البولي أميد، وتكون هذه طريقة حساسة للغاية لتحديد الأحماض الأمينية وعلى وجه الخصوص وجدت استخدامًا كبيرًا في تحديد تسلسل الببتيد، وذلك عند استخدامها بالاقتران مع تدهور (Edman).
كما تم تقديم تقنية (dansyl) في الأصل بواسطة (Gray وHartley)، وتم تطويره بشكل أساسي للاستخدام مع الببتيدات، ومع ذلك، يمكن أيضًا تطبيق الطريقة على البروتينات.
وأخيرا، يمكن تحديد الأمينات والأحماض الأمينية بعد اشتقاقها باستخدام كلوريد دانسيل، فلورسين أيزوثيوسيانات أو كاربوكسي بينزويل، 2 كينولين كاربوكسالديهايد لتحسين حساسية الطريقة.
