يمكن فصل الأحماض الأمينية عن بعضها البعض في محلول من خلال تقنيات مختلفة تستغل خصائصها الفريدة. هنا ، سوف نستكشف بعض الطرق الشائعة المستخدمة لفصل الأحماض الأمينية.
فصل الأحماض الأمينية عن بعضها في محلول
- الكروماتوغرافيا: تستخدم هذه التقنية الاختلافات في القطبية والحجم وتقارب الأحماض الأمينية. يتم استخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) والكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC) بشكل شائع. يتضمن TLC تطبيق خليط من الأحماض الأمينية على طبقة رقيقة من مرحلة ثابتة ، والتي يتم تطويرها بعد ذلك باستخدام نظام مذيب مناسب. عندما يتحرك المذيب لأعلى اللوح تهاجر أحماض أمينية مختلفة بمعدلات مختلفة ، مما يسمح بفصلها. في HPLC ، يتم تمرير الخليط عبر عمود معبأ بمرحلة ثابتة ، ويتم الفصل عن طريق تغيير تكوين الطور المتحرك ومعدل التدفق.
- كروماتوغرافيا التبادل الأيوني: تستخدم هذه الطريقة الاختلافات في الشحنة بين الأحماض الأمينية. يتم تمرير الخليط من خلال عمود يحتوي على راتنج التبادل الأيوني ، والذي يربط بشكل انتقائي الأحماض الأمينية المشحونة. من خلال ضبط الأس الهيدروجيني والقوة الأيونية للمرحلة المتنقلة ، يمكن التصفية الأحماض الأمينية واحدة تلو الأخرى ، مما يسمح بفصلها.
- كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي: تُعرف أيضًا باسم كروماتوغرافيا استبعاد الحجم ، وتفصل هذه التقنية الأحماض الأمينية بناءً على حجمها أو وزنها الجزيئي. يتم تمرير الخليط من خلال عمود معبأ بالخرز المسامي ، وتدخل الأحماض الأمينية الأصغر إلى الحبيبات وتستغرق وقتًا أطول للتخلص منها ، بينما تمر الأحماض الأكبر حجمًا بسرعة أكبر ، مما يؤدي إلى الانفصال.
- الرحلان الكهربائي: تستخدم هذه الطريقة الاختلافات في الشحنة وحجم الأحماض الأمينية. في الرحلان الكهربائي للهلام ، يتم تحميل الخليط على مصفوفة هلامية ، ويتم تطبيق مجال كهربائي. تتحرك الأحماض الأمينية عبر الهلام بمعدلات مختلفة بناءً على شحنتها وحجمها ، مما يؤدي إلى الانفصال.
- الاستخلاص بالمذيبات: تستغل هذه التقنية الاختلافات في الذوبان بين الأحماض الأمينية. من خلال ضبط الأس الهيدروجيني واستخدام المذيبات العضوية ، يمكن استخلاص أحماض أمينية محددة بشكل انتقائي من المحلول ، مما يسمح بفصلها.
من المهم ملاحظة أنه يمكن استخدام هذه الطرق منفردة أو مجتمعة ، اعتمادًا على المتطلبات المحددة لعملية الفصل. بالإضافة إلى ذلك ، تلعب عوامل مثل الأس الهيدروجيني ودرجة الحرارة وتكوين المرحلتين المتنقلة والثابتة دورًا مهمًا في تحقيق الفصل الفعال للأحماض الأمينية.
