كيفية تحضير الوسط الزراعي Blood Agar

الوسط الزراعي (Blood Agar (BA)) عبارة عن وسط مخصب يستخدم لزراعة البكتيريا الحساسة أو الميكروبات التي لا تنمو بسهولة، بحيث تتطلب بيئة غذائية خاصة ومخصبة مقارنة بالبكتيريا الروتينية.

مكونات الوسط الزراعي Blood Agar

• 0.5% ببتون

• 0.3% مستخلص لحم البقر / مستخلص الخميرة

• 1.5% أجار (الوسط الزراعي)

• 0.5% كلوريد الصوديوم NACL

• ماء مقطرة 

• الرقم الهيدروجيني PH يجب أن يكون من 7.2 إلى 7.6 (7.4)

• 5% دم الغنم (Sheep Blood)

تحضير الوسط الزراعي Blood Agar

• يضاف حوالي 40 جرام من الوسط المحضر إلى 1000 مل من الماء المقطر.

• يسخن المحلول حتى الغليان لإذابة الوسط تمامًا.

• تعقيمها عن طريق فرن التعقيم (AUTOCLAVE) بدرجة مئوية 121°C لمدة 15 دقيقة تقريبًا.

• إخراج الوسيط من جهاز التعقيم بالبخار وتبريده إلى حوالي 40-45 درجة مئوية.

• إضافة 5% (vol/vol)من الدم المعقم منزوع الليف (Defibrinated blood) ثم يتم خلطه جيداً لكن برفق.

• سكب الوسائط في ألواح معقمة تحت ظروف معقمة.

• عند سكب الوسائط كن حذر من ظهور فقاعات على الألواح.

• بمجرد أن تصلب الوسائط، يمكن وضع الألواح في فرن الهواء الساخن على درجة حرارة منخفضة لبضع  دقائق لإزالة أي رطوبة موجودة على الألواح قبل الاستخدام.

كيفية تخزين الوسط الزراعية Blood Agar

• يجب تخزين الوسائط في شكل مسحوق بين 10 إلى 30 درجة مئوية في حاوية مغلقة بإحكام، ويجب تخزين الوسيط المحضر عند 20-30 درجة مئوية.

• بعد الفتح، يجب تخزين المنتج بشكل مناسب عندما يجف، بعد تغطية الزجاجة بإحكام لمنع تكون الكتلة حيث أن الوسيط ذو طبيعة استرطابية وبالتالي يمتص الرطوبة بسرعة نسبيًا.

• يجب تخزين الحاوية مع الوسيط في منطقة جافة جيدة التهوية محمية من درجات الحرارة القصوى ومصادر الاشتعال.

• يجب استخدام المنتج قبل تاريخ انتهاء الصلاحية المدون على الملصق.

استخدامات الوسط الزراعي Blood Agar

• الغرض الأساسي من أجار الدم هو زراعة وعزل الكائنات الدقيقة.

• يمكن استخدامه أيضًا لتمييز نوع انحلال الدم القائم على البكتيريا (α- أو β- أو γ- الانحلالي) التي ينتجونها على أجار.

• يمكن استخدام أجار الدم للكشف عن المكورات العنقودية المنتجة للفوسفات عن طريق إضافة فوسفات الفينول فثالين إلى الوسط.  

• تعتبر قاعدة الوسط الزراعي (Blood Agar) طريقة قياسية لتحليل عينات الطعام.