اقرأ في هذا المقال
- أهمية الميديا في مختبر الأحياء الدقيقة السريري
- ما هي ميديا Urea ager؟
- مكونات ميديا urea ager
- مبدأ عمل ميديا urea ager
- طريقة تحضير ميديا urea ager
- ضبط الجودة أثناء تحضير الميديا
أهمية الميديا في مختبر الأحياء الدقيقة السريري:
يقوم مختبر الأحياء الدقيقة السريري على تحضير العديد من أنواع الميديا سواء كانت صلبة أو سائلة أو شبه سائلة، والهدف من هذه الأوساط الصناعية التي يتم تحضيرها في المختبر، تعزيز نمو وتكاثر الخلايا البكتيرية لتكوين مستعمرات من هذه الخلايا البكتيرية الممرضة وأيضاً مراقبة العمليات الأيضية لأنواع البكتيريا التي تنمو وتتكاثر في هذه الأوساط.
ومن الأمثلة على العمليات الأيضية التي يتم مراقبتها، مراقبة قدرة بعض أنواع البكتيريا على تخمر بعض أنواع السكر الموجودة ضمن تركيبة الميديا واستخدام السكر كمصدر من مصادر الطاقة وإنتاج مخلفات وأحماض عضوية نتيجة عملية التخمر، وأيضاً قدرة بعض أنواع البكتيريا على تغير المؤشر الهيدروجيني (PH) عن طريق إنتاج مواد حمضية.
ما هي ميديا Urea ager؟
ميديا (urea ager): هي عبارة عن إحدى أنواع الميديا الذي يتم تحضيرها في مختبر الأحياء الدقيقة السريري، حيث يحتوي هذا النوع من الميديا على بيئة متكاملة لنمو وتكاثر الكائنات الحية الدقيقة، تم اكتشاف هذا النوع من الميديا من قبل العالم كريستنسن (Christensen) حيث حاول هذا العالم مراقبة قدرة بعض أنواع البكتيريا على إنتاجها لأنزيم اليورياز (urease).
ومن خلال دعم البكتيريا في أجار (ager) يحتوي على يوريا (Urea Agar Base)، حيث إنه نوع البكتيريا التي تنمو في هذا الوسط بكتيريا سالبة الجرام وبشكل خاص أنواع البكتيريا من عائلة (Enterobacteriaceae) حيث إن بعض الأنواع من هذه العائلة تستطيع إنتاج إنزيم اليورياز وبعض الآخر لا يستطيع، لذا تستخدم هذه الميديا لتميز بين أنواع البكتيريا (Enterobacteriaceae).
مكونات ميديا urea ager:
تحتوي ميديا (urea ager) في تركيبة على معايير النمو الكاملة، حيث يعتبر وسط زراعي صناعي يحتوي على العديد من العناصر الغذائية ومؤشر لدرجة الحموضة تناسب لنمو أنواع معينه من البكتيريا، ومن أهم مكونات (urea ager):
- الماء المقطر (Distilled water).
- صوديوم كلوريد (NA CL).
- يوريا (urea).
- مؤشر الفينول الأحمر (indicator phenol red).
- الهضم الأنزيمي للجيلاتين (Enzymatic Digest of Gelatin).
- الببتون (peptone).
- الدكستروز (Dextrose).
- الأجار (Ager) الصناعي ويكون على شكل باودر.
مبدأ عمل ميديا urea ager:
تحتوي ميديا (urea ager) على كمية من مادة (urea) حيث تقوم بعض أنواع البكتيريا على استخدام اليوريا، وعند استخدام واستهلاك اليوريا الموجودة في الميديا تتشكل الأمونيا بالتالي يتحول الوسط إلى وسط قاعدي (media alkaline) مما يؤدي إلى تغير لون مؤشر الهيدروجيني (PH) من اللون الأصفر إلى اللون الأحمر الباهت أو الوردي.
حيث يقوم البيبتون الموجود ضمن تركيبة الميديا على تعزيز نمو (Enterobacteriaceae) وتقليل وقت الحضانة، ويعمل الدكستروز الموجود ضمن تركيبة الميديا على التخلص من التفاعلات السلبية الكاذبة ويحفز نشاط اليورياز، حيث إن بعض أنواع البكتيريا تنتج اليورياز بسرعة كبيرة في غضون 6 ساعات من الحضانة حيث يظهر اللون الأحمر، وفي حين يوجد أنواع من البكتيريا تحتاج إلى وقت حتى تنتج اليورزيا حيث تستغرق بعض الأحيان إلى 48 ساعة مثل بكتيريا (Klebsiella).
طريقة تحضير ميديا urea ager:
- ارتداء القفازات والكمامات وتعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات الكيميائية.
- تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية التحضير قبل استخدامها.
- ضع في قارورة زجاجية معقمة (flask) كمية من الماء تناسب كمية الميديا المراد تحضيرها.
- ضع القارورة الزجاجية على النار مع وضع المحرك المغناطيسي فيها.
- ضع ببطء وبشكل تدريجي الأجار الخاص في (urea ager)، مع رفع درجة الحرارة النار بشكل تدريجي.
- مراقبة المزيج حتى يوصل إلى درجة الغليان، نقوم بخفض درجة الحرارة تدريجياً حتى يتحول المزيج إلى الشكل النقي.
- ضع المزيج في الاتوكلايف على درجة حرارة 121 درجة مئوية لمدة تتراوح 15 دقيقة.
- تبريد المزيج حتى يصل إلى درجة حرارة تتراوح 45 درجة مئوية، ثم قم في إضافة قاعدة اليوريا المعقمة.
- خلط المزيج مع قاعدة اليوريا جيداً.
- صب المزيج أنابيب معقمة (sterile tubes).
- تسجيل تاريخ ووقت التحضير، ثم تخزينها في ثلاجة خاصة معقمة ضمن درجة حرارة تتراوح ما بين 2 إلى 6 درجة مئوية.
- تعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات الكيميائية، في الإضافة تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية التحضير.
ضبط الجودة أثناء تحضير الميديا:
- اتباع كافة قواعد السلامة العامة أثناء تحضير الميديا.
- مراقبة المستمرة لدرجة حرارة الثلاجات والحاضنات.
- مراقبة مدى آلية التعقيم أثناء عملية تحضير الميديا.
- حفظ أجار واليوريا في أماكن تخزين بعيداً عن مصادر الرطوبة.
تفسير نتائج على ميديا urea ager:
- النتيجة الإيجابية: تظهر على شكل تطور شديد للون الوردي والأحمر بشكل مائل أو في جميع أنحاء (urea ager)، مثل في بكتيريا (Proteus mirabilis).
- النتيجة السلبية: لا يتغير لون الميديا، على سبيل المثال في بكتيريا (Escherichia coli).
