ميديا bile esculin المستخدمة في مختبر الميكروبيولوجي

قد تختلف أنواع الميديا في مختبر الأحياء الدقيقة السريري في اختلاف الهدف من استخدامها، حيث يوجد منها ما هو مخصص لنمو وتكاثر نوع معين من الكائنات الحية الدقيقة، ومنها ما يستخدم لتميز بين البكتيريا موجبة الجرام وسالبة الجرام، ومنها ما يستخدم لتميز بين أنواع السلالات الواحدة من البكتيريا>

لذلك يقوم مختبر الأحياء الدقيقة السريري في تحضير العديد من أنواع الميديا حتى يتم تحقيق كافة أهداف مختبر الأحياء الدقيقة السريري من نمو وتكاثر الكائنات الحية الدقيقة داخل هذه الأنواع من الميديا لتكوين مستعمرات من خلايا الميكروبية يسهل عزلها ودراسة العمليات الأيضية لها لتوصل في النهاية إلى العلاج المناسب.

ما هي ميديا bile esculin؟

ميديا (bile esculin): هي إحدى أنواع الميديا يتم تحضيرها صناعياً داخل المختبر الأحياء الدقيقة السريري، حيث إنه عبارة عن وسط صناعي انتقائي وتفاضلي (selective and differential) يختبر قدرة الكائنات الحية الدقيقة على تحلل (esculin) عند وجود (bile)، حيث إنه يستخدم بشكل شائع لنمو وتكاثر البكتيريا المعوية بالتحديد من السلالة (Enterococcus).

وسبب إن هذا النوع من الميديا انتقائي (selective) وذلك لأنه يحتوي على (bile) الذي يقوم في تثبيط نمو البكتيريا موجبة الجرام باستثناء سلالة عائلة (enterococci) وبعض من أنواع سلالة (streptococci species) في الإضافة إنه يحتوي على أزيد الصوديوم (sodium azide)، حيث إن هذه المادة الكيميائية تمنع نمو بكتيريا سالبة الجرام.

إما بالنسبة في إنه وسط تفاضلي (differential) وذلك بسبب إنه يحتوي على مادة (esculin) إذ إنها تمكن الكائن الحي الدقيق من تحلل (esculin) بوجود (bile) وإنتاج مادة (esculetin)، حيث إن هذه المادة تتفاعل مع سترات الحديد الموجودة ضمن تركيبة الميديا ويشكل مركبًا من الحديد الفينولي الذي يحول اللون البني الغامق المائل للميديا إلى اللون الأسود.

مكونات ميديا bile esculin:

يقوم موظفين مختبر الأحياء الدقيقة السريري على تحضير العديد من أنواع الميديا داخل مختبر الميكروبيولوجي، وتختلف  مكونات هذه الأنواع من الميديا بسبب اختلاف وظائفها، حيث يتم دعم الميديا بمكونات تعزز نمو وتكاثر البكتيريا المراد عزلها وتميزها ودراسة العمليات الأيضية لها، حيث إنه يتم دعم ميديا من النوع (bile esculin) في مكونات أساسية بحيث إن هذه المكونات تعزز نمو وتكاثر بكتيريا من سلالة (enterococci) وبعض من أنواع بكتيريا (streptococci species)، ومن أهم مكونات ميديا (bile esculin):

• ماء مقطر (distilled water).

• (esculin).

• سترات الحديد (Ferric Citrate).

• (bile).

• بيبتون (pep-tone).

• أنسجة حيوانية مهضمومة ومخصبة.

• أزيد الصوديوم (sodium azide).

• أجار (agar) صناعي على شكل باودر.

طريقة تحضير ميديا bile esculin داخل مختبر الميكروبيولوجي:

• ارتداء القفازات والكمامات، وتعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات ومعقمات الكيميائية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

• أقرأ طريقة التحضير المدونة على عبوة الأجار الخاص في ميديا (bile esculin).

• ضع كمية من الماء المقطر (distilled water) في القارورة زجاجية معقمة (flask)، بحيث تكون كمية ماء المقطر تناسب كمية الميديا المراد تحضيرها.

• ضع القارورة الزجاجية المعقمة على النار، ضع المحرك المغناطيسي (magnatic) في القارورة الزجاجية.

• ضع ببطء وبشكل تدريجي الأجار (agar) المخصص لميديا (bile esculin) قبل إن يسخن الماء، ثم يتم رفع درجة حرارة النار بشكل تدريجي.

• مراقبة القارورة الزجاجية حتى يذوب مسحوق الأجار فيها بشكل كامل، ويتحول المزيج من الشكل الغائم إلى شكل النقي.

• يجب عدم وضع المزيج في الأوتوكلاف (autoclaved).

• وضع القارورة الزجاجية في حمام مائي في درجة حرارة تتراوح ما بين 45 إلى 50 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة، حيث يتم قياس درجة حرارة الماء باستخدام ميزان حرارة معقم.

• يتم صب الميديا في (Petri plates) معقمة بعد أن تبرد وتصل درجة حرارتها من درجة حرارة الغرفة، استخدم ميزان الحرارة المعقم لمراقبة حرارة الميديا.

• يتم تسجيل على (Petri plates) تاريخ ووقت تحضير الميديا.

• ضع (Petri plates) في ثلاجة معقمة للتخزين ضمن درجة حرارة 2 إلى 6 درجة مئوية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

• تعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات والمعقمات الكيميائية.

ضبط الجودة أثناء تحضير ميديا bile esculin:

• تطبيق كافة قواعد وقوانين السلامة العامة أثناء تحضير الميديا.

• التأكد من تعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات الكيميائية، والتأكد من طريقة تحضير هذه المطهرات بشكل صحيح وضمن النسب الصحيحة.

• التأكد من دقة تعقيم الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

• التأكد من درجات الحرارة الثلاجات من خلال التأكد من دقة ميزان الحرارة.