ميديا SDA Agar المستخدمة في مختبر الميكروبيولوجي

تتعدد أنواع الميديا المستخدمة في مختبر الأحياء الدقيقة السريري، حيث إن الميديا عبارة عن وسط بيئي صناعي يتم تحضيره في مختبر الأحياء الدقيقة والهدف منه تعزز نمو وتكاثر الكائنات الحية الدقيقة، وتختلف أنواع الميديا في ما بينها حسب اختلاف نوع الكائن الحي الدقيق الذي ينمو ويتكاثر داخلها.

وعلى هذا الأساس يتم تحضيرها داخل مختبر الميكروبيولوجي حيث يتم دعم أنواع الميديا مختلفة بمكونات أساسية تعزز نمو وتكاثر أنواع معينة من الكائنات الحية الدقيقة وتثبيط أنواع أخرى من الخلايا الميكروبية بالتالي سهولة التميز بين أنواع الخلايا الميكروبية مختلفة داخل مختبر الأحياء الدقيقة السريري مما يؤدي إلى سهولة تشخيص الخلايا الميكروبية الممرضة ووصل إلى العلاج المناسب لها.

ما هي ميديا SDA Agar؟

ميديا (SDA Agar): هي عبارة عن إحدى أنواع الميديا التي يتم تحضيرها داخل مختبر الأحياء الدقيقة السريري وهو اختصار لمصطلح (Sabouraud Dextrose Agar)، حيث تم اكتشاف هذا النوع من الميديا عام 1892 من أجل عزل وزراعة أنواع الفطريات والخمائر المسببة في أمراض مختلفة.

حيث يتم ضبط هذا النوع من الميديا في معدل رقم هيدروجيني (PH) في قيمة 5،6 تقريباً من أجل تعزيز نمو الفطريات وخاصة فطريات الجلد، حيث إن قيمة الرقم الهيدروجيني هذه تعمل على تثبيط نمو البكتيريا بشكل طفيف في العينات السريرية.

مكونات ميديا SDA Agar:

يتم اختيار مكونات ميديا (SDA Agar) على أساس تعزز نمو وتكاثر الفطريات والخمائر وتثبط نمو وتكاثر الخلايا الميكروبية الأخرى، كما يتم اختيار مواد ومكونات أثناء تحضير هذا النوع من الميديا تقوم على ضبط درجة الحموضة أو ما يعرف بمؤشر الهيدروجيني بحيث تكون درجة الحموضة تناسب تعزيز نمو وتكاثر الفطريات والخمائر، ومن أهم مكونات ميديا (SDA Agar):

• ماء مقطر (Distilled Water) أو يمكن استخدام ماء منزوع الأيونات (deioinized water).

• بيبتون (Peptone).

• سكر العنب ما يعرف في اسم (Dextrose).

• أنسجة حيوانية مهضومة.

• أجار (Agar) صناعي على شكل باودر.

مبدأ عمل ميديا SDA Agar:

تحتوي ميديا ( SDA Agar) على بيبتون والأنسجة الحيوانية المهضومة التي توفر مصدر النيتروجين والفيتامينات المطلوب لنمو الكائن الحي في ميديا (SDA)، كما تحتوي الميديا على سكر العنب (Dextrose) الذي يعتبر مصدر للطاقة والكربون، حيث يمكن إضافة مكونات على الميديا مثل (Chloramphenicol) أو (tetracycline) وتعتبر هذه المواد مضادات للميكروبات واسعة الطيف، حيث تلعب دور في منع نمو وتكاثر مجموعة واسعة من البكتيريا موجبة الجرام وسالبة الجرام، كما يمكن إضافة مادة (Gentamicin) التي لها دور في منع نمو البكتيريا سالبة الجرام.

طريقة تحضير ميديا SDA Agar:

• ارتداء القفازات والكمامات، وتعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات ومعقمات الكيميائية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

• ضع كمية من الماء المقطر أو ماء منزوع الأيونات في القارورة زجاجية معقمة (flask)، بحيث تكون كمية ماء المقطر تناسب كمية الميديا المراد تحضيرها.

• ضع القارورة الزجاجية على النار، ضع المحرك المغناطيسي في القارورة الزجاجية.

• ضع ببطء وبشكل تدريجي الأجار قبل إن يسخن الماء، رفع درجة حرارة النار تدريجياً.

• يتم إضافة حمض الهيدروكلوريك (hydrochloric acid)، والهدف منها ضبط مؤشر الرقم الهيدروجيني (PH) في قيمة تتراوح 5،6.

• مراقبة القارورة الزجاجية حتى يذوب مسحوق الأجار بشكل كامل ويتحول المزيج من الشكل الغائم إلى الشكل النقي.

• يتم وضع المزيج في الأوتوكلاف (Autoclave) في حرارة تتراوح 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

• يتم صب الميديا في (Petri plates) معقمة أو في أنابيب معقمة (tubes for slant) بعد أن تبرد وتصل درجة حرارتها من درجة حرارة الغرفة، استخدم ميزان الحرارة معقم لمراقبة حرارة الميديا.

• ضع (Petri plates) أو (tubes for slants) في ثلاجة معقمة للتخزين ضمن درجة حرارة 2 إلى 6 درجة مئوية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

• تعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات أو معقمات الكيميائية.

ضبط الجودة أثناء تحضير ميديا SDA Agar:

• تطبيق كافة قواعد وقوانين السلامة العامة الخاصة في مختبر الأحياء الدقيقة السريري.

• تطبيق كافة قواعد وأساليب التعقيم أثناء تحضير الميديا.

• التأكد من دقة عمل ميزان الحرارة، وتجنب التلوث في مادة الزئبق إذا حدث كسر لميزان الحرارة.

• التأكد من درجة حرارة الثلاجة التخزين والحاضنات والأوتوكلاف (Autoclave).

• التأكد من دقة تحضير المطهرات الكيميائية المستخدمة في تعقيم مساحات العمل.

• التأكد من أماكن تخزين الأجار الصناعي بعيداً عن مصادر الرطوبة وتلوث.

• التخلص من النفايات الطبية الخاصة في تحضير الميديا في حاويات النفايات الطبية.

استخدامات ميديا SDA Agar:

• تستخدم ميديا (SDA Agar) بشكل أساسي في الزراعة الانتقائية للخمائر والعفن والبكتيريا الحمضية.

• غالبًا ما يستخدم هذا الوسط البيئي الصناعي مع المضادات الحيوية لعزل الفطريات المسببة للأمراض من المواد التي تحتوي على أعداد كبيرة من الفطريات أو البكتيريا الأخرى.

• يتم استخدام هذه الميديا أيضًا لتحديد التلوث الجرثومي في الأغذية ومستحضرات التجميل والعينات السريرية.

تفسير نتائج مستعمرات على ميديا SDA Agar:

يتم التعرف على مستعمرات الفطريات التي تنمو وتتكاثر على ميديا ( SDA Agar) خلال مراقبة جوانب مختلفة من مورفولوجيا المستعمرة ، والتركيبات المجهرية المميزة، ومعدل النمو ، والوسائط التي تدعم نمو الكائن الحي، ومصدر العينة، حي يتم تحديد الخمائر والفطريات الممرضة من خلال العديد من الاختبارات البيوكيميائية التي تجرى في مختبر الأحياء الدقيقة السريري.

حيث إنه تنمو بعض الخمائر والفطريات الممرضة بشكل كريمي أو مستعمرات بيضاء، وبعضها الآخر سوف تنمو في مستعمرات خيطية بألوان مختلفة، على سبيل المثال فطريات من سلالة (Candida albicans) تنمو بشكل جيد على ميديا (SDA Agar) في مستعمرات بشكل كريمي بيضاء في المقارنة مع سلالة (Aspergillus brasiliensis) تنمو مستعمراتها على ميديا (SDA Agar) بشكل خيوط سوداء اللون.

محدوديات استخدام ميديا SDA Agar في مختبر الميكروبيولوجي:

• قد تصادف بعض السلالات من الفطريات والخمائر التي تنمو بشكل سيئ أو تفشل في النمو على هذا النوع من الميديا.

• العوامل المضادة للميكروبات التي قد تضاف إلى الميديا والتي تستخدم لتثبيط البكتيريا سالبة وموجبة الجرام قد تمنع أيضًا نمو وتكاثر بعض أنواع الفطريات المسببة للأمراض.

•  ضرر ببعض عوامل الميديا عند ارتفاع درجة حرارة الميديا أو تخزينها ضمن درجة حرارة أعلى من 8 درجة مئوية، وهذا يؤدي إلى تثبيط نمو العديد من أنواع الفطريات والخمائر.

• يجب إن تدعم نتائج هذه الميديا في اختبارات بيوكيميائية أو اختبارات مورفولوجية لتأكد من نوع الفطريات المسببة للمرض.