ميديا XLD Agar المستخدمة في مختبر الميكروبيولوجي

ما هي ميديا XLD Agar؟

ميديا (XLD Agar): هو إحدى أنواع الميديا التي يتم تحضيرها صناعياً داخل مختبر الأحياء الدقيقة السريري، حيث إن (XLD Agar) هي اختصار لمصطلح (Xylose Lysine Deoxycholate)، ويعتبر هذا النوع من الميديا انتقائي (selective medium) لأنه عبارة عن وسيلة انتقائية لعزل سلالات من بكتيريا (Salmonella) وأيضاً سلالات من بكتيريا (Shigella spp) حيث إنه يتم عزل هذه الأنواع من البكتيريا إما من عينات سريرية ومرضية أو من عينات من طعام ملوث.

والهدف من اكتشاف هذا النوع من الميديا في الأصل عزل سلالات من بكتيريا (Shigella spp) من عينات البراز الممرضة، وتم تطوير هذا النوع من الميديا في ما بعد لفحص العينات من طعام  وبعض منتجات الألبان والمياه لوجود سلالات من بكتيريا (Salmonella) الممرضة والسامة.

مكونات ميديا XLD Agar:

يقوم مختبر الأحياء الدقيقة السريري أثناء تحضير الميديا من نوع (XLD Agar) على أخذ بعين الاعتبار أن هذا النوع من الميديا يعزز نمو سلالات بكتيريا من النوع (Salmonella and Shigella spp)، لذلك يجب إن تكون مكونات ميديا (XLD Agar) تعزز نمو كلأ النوعين من البكتيريا من أجل تكاثرها ونموها لتكوين مستعمرات بكتيرية يسهل عزلها ودراسة العمليات الأيضية لها، كما يتم النظر إلى إن مكونات هذه الميديا يجب أن تحتوي على عوامل من أجل التفريق والتميز بين المستعمرات البكتيرية لكلأ النوعين، ومن أهم مكونات الأساسية لميديا (XLD Agar):

• ماء منزوع الأيونات (deionized water).

• اللاكتوز (Lactose).

• سكروز (Sucrose).

• ثيوسلفات الصوديوم (Sodium Thiosulfate).

• ليسين (L-Lysine).

• كلوريد الصوديوم (Sodium Chloride).

• (Xylose).

• خلاصة الخميرة (Yeast Extract).

• ديوكسيكولات الصوديوم (Sodium Deoxycholate).

• سيترات الأمونيوم الحديد (Ferric Ammonium Citrate).

• فينول أحمر (Phenol Red).

• أجار (Agar) صناعي على شكل باودر.

• مؤشر الرقم الهيدروجيني حيث يتراوح قيمة (PH) إلى 7،4.

مبدأ عمل ميديا XLD Agar:

يعتبر (XLD Agar) وسط انتقائي تفاضلي (selective and differential medium)، ويعتبر وسط انتقائي وذلك لأنه يحتوي على (sodium deoxycholate) حيث يعمل داخل الميديا في مثابة عامل انتقائي يثبط نمو جميع أنواع البكتيريا موجبة الجرام، ويعتبر الوسط تفاضلي لأنه يتم تميز سلالات بكتيريا (Shigella) عن باقي سلالات البكتيريا المعوية وذلك لأن الميديا تحتوي على (Xylose) حيث تقوم جميع أنواع البكتيريا المعوية على تخميره باستثناء بكتيريا (Shigella).

وهذه الخاصية تمكن من التمايز بين سلالات (Shigella) عن غيرها من أنواع البكتيريا ويعتبر هذا النوع من الميديا تفاضلي أيضاً وذلك لأنه يحتوي على (Lysine) حيث تقوم سلالات بكتيريا (Salmonella) على تخمر (Xylose) بسرعة كبيرة حيث أنها بعد أن تستنفد السالمونيلا إمداد الزيلوز في الكامل، تقوم على مهاجمة اللايسين عبر إنزيم اللايسين ديكاربوكسيلاز.

وبالتالي يؤدي إلى إنتاج مواد حمضية ومخلفات عضوية تؤدي إلى تغير درجة الحموضة داخل الميديا مما يؤدي إلى تغير لون أحمر الفينول إلى اللون الأصفر، وتحتوي الميديا أيضاً على ثيوسلفات الصوديوم وسيترات الأمونيوم الحديد وذلك لتطوير إنتاج كبريتيد الهيدروجين في بعض أنواع البكتيريا مما يؤدي إلى ظهور مستعمرات ذات مراكز سوداء.

طريقة تحضير ميديا XLD Agar:

• ارتداء القفازات والكمامات، وتعقيم مساحة العمل بواسطة المطهرات ومعقمات الكيميائية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

• ضع كمية من الماء المنزوع الأيونات في القارورة زجاجية معقمة (flask)، بحيث تكون كمية الماء تناسب كمية الميديا المراد تحضيرها.

• ضع القارورة الزجاجية على النار، ضع المحرك المغناطيسي في القارورة الزجاجية.

• ضع ببطء وبشكل تدريجي الأجار قبل إن يسخن الماء، رفع درجة حرارة النار تدريجياً.

• مراقبة القارورة الزجاجية حتى يذوب مسحوق الأجار بشكل كامل ويتحول المزيج إلى شكل النقي.

• يجب عدم وضع المزيج في الأوتوكلاف (AUTOCLAVE).

• نقل المزيج على الفور إلى حمام مائي عند 50 درجة مئوية لمدة تتراوح 15 دقيقة.

• يتم صب الميديا في (Petri plates) معقمة بعد أن تبرد وتصل درجة حرارتها من درجة حرارة الغرفة، حيث يتم استخدم ميزان الحرارة لمراقبة حرارة الميديا.

• يتم تسجيل على (Petri plates) تاريخ ووقت التحضير.

• ضع (Petri plates) في ثلاجة التخزين ضمن درجة حرارة 2 إلى 6 درجة مئوية.

• تعقيم كافة الأدوات والمعدات المستخدمة في تقنية تحضير الميديا.

ملاحظة: يجب اتباع قواعد وقوانين السلامة العامة أثناء تحضير الميديا.

استخدامات ميديا XLD Agar:

• يستخدم (XLD Agar) في مثابة وسيط تفاضلي انتقائي لعزل مسببات الأمراض المعوية سالبة الجرام من العينات البرازية والمواد السريرية الأخرى.

• يعتبر ميديا (XLD Agar) مناسبة بشكل خاص لعزل سلالات بكتيريا من أنواع الشيغيلا والسالمونيلا.

• يستخدم (XLD Agar) الاختبارات المكروبيولوجية للأغذية والمياه ومنتجات الألبان.