كيفية صبغ الكائنات الحية الدقيقة:
تصبغ الكائنات الحية الدقيقة لكي تتم رؤيتها بصورة واضحة تحت المجهر. كما أن هناك نوعان من الصبغات بسيطة وتمييزية (Simple And Differential):
- التصبيغ البسيط.
- صبغة غرام.
أولاً: التصبيغ البسيط (Simple Staining)
بعد الحصول على المزارع النقية، فالخطوة الأولى في تعريف هذه الكائنات الدقيقة هي تصبيغها لرؤيتها تحت المجهر، ويتم ذلك حسب الخطوات التالية:
- تحضير المسحة على الشرائح الزجاجية (Preparation Of Smear)؛ خذ شريحة زجاجية نظيفة ثم ضع فوقها نقطة من الماء المقطر والمعقم مستخدماً الحلقة المعدنية (Wire Loop)، ثم خذ جزءاً من المستعمرة البكتيرية على سبيل المثال، واخلطها مع بعضها، ثم اعمل مزيجاً وانشره على الشريحة الزجاجية واتركه يجف.
- أضف صبغة المثيلين الزرقاء (Methylene Blue) على المسحة ثم اتركها لمدة دقيقة أو دقيقتين، ثم اغسلها بالماء واتركها تجف. ضع نقطة من الزيت على المسحة المكونة، ثم افحصها تحت المجهر مستخدماً العدسة الزيتية.
ثانيا: صبغة جرام (Gram Staining)
طريقة التصبيغ هذه تمييزية حيث يتم فصل أنواع البكتيريا إلى نوعين: بكتيريا جرام الموجبة وتظهر باللون الأزرق أو البنفسجي وبكتيريا جرام سالبة والتي تظهر باللون الأحمر. ويُمكن اتباع الخطوات التالية:
- حضر المسحة من المزارع النقية على الشريحة الزجاجية كما في السابق.
- أضف صبغة المثلين الزرقاء أو صبغة البلورات البنفسجية ثم اتركها لمدة دقيقة واحدة ثم أغسلها بالماء.
- أضف صبغة اليود على المسحة ولمدة دقيقة واحدة ثم اغسل الشريحة بالماء.
