اقرأ في هذا المقال
- مكونات مستنبت نوفي ماكينال نيكول
- خصائص مستنبت نوفي ماكينال نيكول
- الزراعة باستخدام مستنبت نوفي ماكينال نيكول
مستنبت نوفي ماكنيال نيكول ((NNN) Novy-MacNeal-Nicolle medium): هو عبارة عن وسط زراعي، يُستخدم لنمو بعض الأحياء الدقيقة مثل الطفيليات، ويتكون من كحلول لوك مضافاً إليها آجار الدم، ليصبح وسط نمو مغذي.
مكونات مستنبت نوفي ماكينال نيكول
يتكون مستنبت نوفي ماكينال نيكول من:
- الآغار (Agar): هو مادة تشبه الهلام تتكون من عديد السكاريد، مأخوذة من جدران الخلايا لبعض أنواع الطحالب.
- محلول لوك (Locke’s solution): هو نوع من محلول الملح المتوازن والمكونات الرئيسية هي NaCl و KCl و NaH2PO4 و CaCl2 و NaHCO3 والجلوكوز.
- الدم (Blood): هو عبارة عن دم من الثدييات مثل الأغنام أو الخيول أو حتى الإنسان، ليعمل كوسط تفاضلي مخصب لعزل الكائنات الحية الدقيقة.
خصائص مستنبت نوفي ماكينال نيكول
يمتلك مستنبت أو وسط نوفي ماكينال نيكول العديد من الخصائص:
- إن مستنبت نوفي ماكينال نيكول هو وسط غذائي سائل، يُستخدم لنمو طفيليات الليشمانيا وطفيليات المثقبيات السوطية الكروزية.
- يسمى مستنبت نوفي ماكينال نيكول باسم ميديا NNN، ويُعرف باسم وسيط محول الطور لأنه ينقل الأماستيغوت (شكل من أشكال الليشمانيا غير المتحركة) إلى البروماستيجوت (شكل متحرك وخارج الخلية).
- يتوفر هذا المستنبت على شكل مسحوق يتم إذابته وتحضيره في مياه معقمة.
- تبقى الوسائط المحضرة مستقرة لمدة تصل إلى 4 أسابيع في الثلاجة (2-8 درجة مئوية)، ولا يجوز استعمالها بعد شهر لأنها تكون قد فسدت.
- يستخدم هذا المستنبت لتأكيد التشخيص بدلاً من الاختبارات الأخرى، وللحصول على عدد كبير من الكائنات الحية للدراسات المصلية وكما يمكن أخذ عينة من المستنبت بعد عملية الزراعة، وتلطيخها بصبغة جيمسا.
الزراعة باستخدام مستنبت نوفي ماكينال نيكول
تتم الزراعة باستخدام مستنبت NNN على النحو الآتي:
- تحضير مستنبت NNN أو اخراج المحضر مسبقاً من الثلاجة، ليبقى في درجة حرارة الغرفة.
- يتم تلقيح العينة والتي قد تكون إما خزعة نخاع العظم، أو شفط الطحال، أو شفط العقدة الليمفاوية، وضعه في المستنبت السائل.
- احتضان المستنبت لمدة 4 أسابيع عند درجة حرارة من 21-26 درجة مئوية.
- يتم بعد 4 أيام التحقق من نمو الكائن الحي والتلوث الجرثومي المحتمل الآخر، ويتم تكرر ذلك كل 4 أيام لمدة 4 أسابيع.
- إذا حدث نمو في الوسط، فإنه يتم أخذ عينة وتلطيخها بصبغة جيمسا، لرؤية البروماسيغوت تحت المجهر، وإن وجود البروماستيغوت الشكل المتحرك دلالة على إيجابية النمو.