ما هي تقنية الكوجا آغار

تقنية الكوجا آغار (Koga agar): هي تقنية مخبرية تُستخدم للكشف عن يرقات الديدانالطفيلية، حيث يتم عمل تحضين للبراز الطازج على صفيحة من الآغار، حيث تنمو هذه اليرقات وتتحرك تركةً آثاراً مميزة على سطح الآغار، ويمكن رؤية هذه الآثار بالعين المجردة، ثم تتم رؤية اليرقات عن طريق الفحص المجهري بالميكروسكوب.

خصائص تقنية الكوجا آغار

تمتلك تقنية الكوجا آغار العديد من الخصائص، وهذه الخصائص هي:

• يتم استخدام تقنية الكوجا آغار للكشق عن يرقات بعض ديدان النيماتودا مثل الديدان الأسطوانية الشعرية.

• سميت هذه التقنية بهذا الاسم نسبةً للعالم كوجا الذي ابتكرها وطورها في عام 1991.

• يقوم مبدأ عمل تقنية الكوجا آغار على عمل زراعة من عينة البراز على مستنبت زراعي الآغار، والذي يكون غني بمكونات تمكن اليرقات من النمو والتحرك بداخله، وتشكل خطوط بداخل هذا المستنبت الزراعي.

المواد المستخدمة في تقنية الكوجا آغار

يتم استخدام المواد التالية في تقنية الكوجا آغار:

• المستنبت الزراعي الذي يتكون من 1.5٪ أجار و0.5٪ ومستخلص لحم و1.0٪ من الببتون و 0.5٪  من كلوريد الصوديوم.

•  صفيحة أجار  وتكون بقطر 100 ملم.

• الحاضنة وهي شبيهة بالمايكرويف، والتي يتم استخدامها بعد عملية الزراعة، لتبقي العينة دافئة حتى تنمو اليرقات.

• محلول SAF.

• تحتاج هذه التقنية أيضاً إلى شريحة وغطاء الشريحة وماصة بلاستيكية وملعقة مخبرية وجهاز طرد مركزي وأنبوب شفاف ومجهر ضوئي.

• عينة براز طازجة، وتم جمعها في الصباح الباكر ووضعها في وعاء خاص بها.

خطوات عمل تقنية الكوجا آغار

يتم عمل تقنية الكوجا آغار بالخطوات التالية:

• يتم تحضير 1000 مل من وسط أغار عن طريق توزين 15 جرام من الأغار، و5 جرام من مستخلص اللحم، و 10 جرام من الببتون، و 5 جم من كلوريد الصوديوم،  وإذابته في 1000مل من الماء.

• يتم توزيع 10 مل من الآغار المحضر على كل لوحة أغار نظيفة، وتركه ليبرد في درجة حرارة الغرفة.

•  يمكن تحضير أطباق الأغار سابقاً، وتخزينها في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية لمدة لا تزيد عن أسبوع.

•  أخذ ما يقرب من 2 جم من عينة البراز الطازجة، ووضعها في منتصف طبق الأغار.

• وضع الطبق في الحاضنة عند درجة حرارة من 26 – 33 درجة مئوية لمدة 48 ساعة.

• بعد مرور يومين يتم فحص لوح الآغار بصرياً بحثاً عن آية مسارات مميزة لليرقات.

• يتم وضع لوحة الآغار تحت مجهر ضوئي، وفحص اللوحة بأكملها بحثاً عن وجود يرقات، وتكون قوة التكبير للمجهر x40.

• يتم وضع 15 مل من محلول SAF  بواسطة الماصة على كل لوحة لغسل سطح أجار، ثم يتم جمع ذلك مع نفس الماصة، تم نقلها إلى أنبوب طرد مركزي سعتة 15 مل ووضعه في جهاز الطرد المركزي لمدة 5 دقائق.

• يتم سكب المادة الطافية بعناية دون الإخلال بالرواسب على شريحة زجاجية وتغطيتها، ثم رؤية هذه العينة تحت المجهر مرة أخرى بقوة تكبير من 100-400، للتعرف على هذه اليرقات وعددها وتسجيل ذلك.

نتيجة تقنية الكوجا آغار

تكون نتيجة تقنية الكوجا آغار على النحو الآتي:

• نتيجة سلبية: عدم نمو اليرقات وعدم رؤية آثار لتحرك هذه اليرقات على الآغار بالعين المجردة، ولا يوجد أية يرقات عند رؤية العينة تحت المجهر.

• نتيجة إيجابية: رؤية نمو وتحرك اليرقات بمسارات في مستنبت الوسط الغذائي الآغار، ثم رؤية اليرقات تحت المجهر والتعرف على شكلها وعددها ويجب تدوين هذه الأمور.