خلايا أليف الفضة

الألياف الشبكية:

الألياف الشبكية هي ألياف متفرعة للغاية وحساسة، ومُحبة للجراثيم تلطخ بمحلول الفضة النشادر، حيث أظهرت الدراسات المجهرية الإلكترونية أنها عبارة عن كولاجين شاب أو حزمة صغيرة من ألياف الكولاجين.

هذه الألياف غير مرئية مع صبغة (H&E) الروتينية، ولكن يمكن إثباتها من خلال تفاعل حمض شيف الدوري (PAS) بسبب تركيبها الجزئي من الكربوهيدرات، ويمكن أيضًا إظهار الأغشية القاعدية التي ترتكز عليها الخلايا الظهارية بواسطة محاليل الفضة النشادر وتفاعل (PAS).

تُستخدم بقع الفضة النشادر بشكل شائع لتلطيخ الألياف الشبكية والغشاء القاعدي، حيث تتوفر مجموعة متنوعة من الطرق بما في ذلك طريقة (Snook’s و Wilder’s و Foot’s و Jones’s و Gomori) الدورية من حمض الميثينامين الفضي (PAMS).

قبل التلوين هناك حاجة إلى ثلاث خطوات عامة: إزالة رواسب الزئبق إذا تم استخدام مثبتات الزئبق، هناك حاجة إلى شرائح مغلفة باللاصق على سبيل المثال (APES) لتجنب انفصال الأنسجة عن الأقسام والأواني الزجاجية للتنظيف الحمضي والمطلوبة لإعداد المحلول وتلطيخه.

هذه الخطوات ضرورية لجميع تقنيات التشريب المعدني، ومعظم هذه الطرق للألياف الشبكية لها آليات تلطيخ مماثلة، حيث باختصار تأخذ بقع الفضة النشادر الترسبات الكيميائية الأساسية للفضة المعدنية من الأملاح الفضية، كما هو الحال في طباعة الأفلام التقليدية بالأبيض والأسود.

هناك عدة خطوات رئيسية شائعة في بقع الفضة هذه: الأكسدة، التحسس، التعرض لمحلول الفضة، التقليل، التنغيم، إزالة الفضة غير المتفاعلة والتلوين المناسب.

الهدف من الأكسدة هو تعزيز التلوين اللاحق للألياف الشبكية، إذ يتم استخدام حمض الفوسفوموليبديك وبرمنجنات البوتاسيوم متبوعًا بمعالجة حمض الأكساليك والحمض الدوري في طرق مختلفة.

يُعتقد أن الخطوة الحساسة مرتبطة بالمركبات المعدنية العضوية مع الأنسجة، حيث تشمل المحفزات الشائعة نترات اليورانيل ومحلول نترات الفضة المخفف، وعادةً ما تحتوي محاليل الفضة النشادر على تركيز عالٍ من مركب ديامين الفضة وتركيز منخفض من أيونات الفضة بسبب ارتفاع قيمة الأس الهيدروجيني (~ 12).

تختلف أوقات التعرض لمحلول الفضة النشادر باختلاف الإجراءات، حيث عادة لا يظهر أي تغيير إجمالي في اللون في الأنسجة حتى يتم تقليل الأقسام، ويسمى التخفيض أحيانًا أيضًا بالتطور، إن الهدف من التخفيض هو إحداث ترسبات الفضة المعدنية من أملاح الفضة في الأنسجة.

الفورمالين (الفورمالديهايد) هو كاشف الاختزال الأكثر شيوعًا، إذ يمكن تخفيف الترسبات ذات اللون البني والأسود بعد الاختزال عن طريق المعالجة بكلوريد الذهب والتي يتم اختزالها إلى الذهب المعدني الأسود الأرجواني وتجعل الفضة المعدنية تتأكسد إلى أيونات الفضة.

يمكن إزالة الفضة غير المتفاعلة عن طريق تكوين مركب فضي قابل للذوبان بمحلول ثيوسلفات الصوديوم، مضاد التبطين غير شائع في معظم الطرق، كما يمكن استخدام اللون الأخضر الفاتح في تلطيخ (PAMS).

تشريب الألياف الشبكية بالفضة:

يحتوي النسيج الضام على ثلاث مواد ليفية: ألياف كولاجينية وألياف مرنة وألياف شبكية، حيث يتم احتواء الثلاثة جميعًا داخل الرئة ولكن ينصب التركيز على الأمرين الأولين وكيف يمكن أن تؤثر الشيخوخة على تكوينها ووظائف الرئة.

تتكون الألياف الكولاجينية للرئتين من بروتين الكولاجين وتحتوي جميع الهياكل الرئوية المهمة على هذه الكولاجين، حيث في الواقع هذه هي أهم البروتينات داخل الرئتين وهي تمنح الرئتين قوة شد مرونية في التمدد.

تحتوي الألياف المرنة التي يقل عددها بحوالي 50٪ عن الألياف الكولاجينية على بروتين الإيلاستين وتمتلك خاصية المرونة والقدرة على التشويه عن طريق التمدد ثم العودة إلى الشكل الأصلي، ومن السهل تصور ذلك باستخدام شريط مطاطي.

تتكون الأم الحنون من الحبل الشوكي من الكولاجين والألياف الشبكية، حيث يتم لف النسيج الشبكي بشكل وثيق حول الحبل الشوكي ويمر للخلف في الشق الأوسط المتوسط، ألياف الكولاجين خارجية لتشكيل حزم الألياف الشبكية.

هذه هي النقطة التي توجد فيها أوعية سطح الحبل الشوكي على كل جانب، ترسل الألياف الكولاجينية حاجزًا طوليًا رقيقًا بشكل جانبي، والحافة الجانبية لهذا الرباط المسنن خالية من بعض العمليات التي تندمج مع الأم العنكبوتية والأم الجافية، مما يساعد على تثبيت الحبل الشوكي.

يمكن استخدام المقاطع المجمدة والباردة والسيليويد لإظهار الألياف الشبكية، حيث أن معظم التقنيات المنشورة مخصصة للاستخدام مع أقسام البارافين، إذ يتم إجراء التشريب على الأنسجة بعد مجموعة واسعة من المثبتات.

تسبب المثبتات المحتوية على أملاح المعادن الثقيلة للزئبق أو الأوزميوم أحيانًا القليل من الترسيب الخلفي غير المحدد للفضة، سوائل التشريب بالفضة ذات الحساسية الكافية لهذه التقنيات هي أساسًا قلوية وتتسبب في كثير من الأحيان في فصل الأقسام عن الشريحة، كما يمكن استخدام المواد اللاصقة على الرغم من أن أي مادة لاصقة زائدة قد تسبب ترسبًا غير مرغوب فيه حول الأنسجة وتحتها.